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简要描述:产品品牌:陶术产品货号:C0066产品名称:人 CD34 + 细胞富集试剂盒(阴性选择)产品规格:2mL (for 1×10^9 cells)陶术 人 CD34+细胞富集试剂盒(阴性选择)
品牌 | 陶术生物 | 货号 | C0066 |
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规格 | 2mL (for 1×10^9 cells) | 供货周期 | 现货 |
陶术 C0066 人 CD34 + 细胞富集试剂盒(阴性选择)
陶术 人 CD34+细胞富集试剂盒(阴性选择)
产品货号:C0066
产品名称:人 CD34 + 细胞富集试剂盒(阴性选择)
产品规格:2mL (for 1×10^9 cells)
产品简介:
TargetMol 的人 CD34+ 细胞分选试剂盒 (阴选) 提供超顺磁性微珠,采用阴性分选法,从人外周血单个核细胞(PBMC)中分离出 CD34+ 细胞。原理是选用生wu素(biotin)标记的单克隆抗体对非目标细胞(非 CD34+ 细胞)进行标记,然后通过链霉亲和素(streptavidin)标记的磁珠对非目标细胞进行清除,从而达到人外周血 CD34+ 细胞分选的目的。
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
活性高:分选后细胞功能保持完好,无异常激活,无抗体和磁珠标记。
易操作:无需使用分离柱,通过磁力架即可实现目标细胞分离。
速度快:最快 30 min 即可完成 CD34+ 细胞富集。
富集效率高:一步富集可达到10倍浓缩,两步富集可达到 30 倍浓缩。
适用于从人脐带血单个核细胞(CBMC)或外周血单个核细胞(PBMC)中富集 CD34+ 细胞。
操作说明:
制备人CBMC或PBMC:通过Ficoll密度梯度离心法从人脐带血或人外周血中分离出单个核细胞,收集后用PBS洗涤细胞,离心。离心结束后,弃去上清液,将CBMC或PBMC重悬于分选缓冲液中,并调整细胞浓度至1×10^8个细胞/mL。
注:分选缓冲液推荐配方:PBS,含有2 mM EDTA和2% FBS;或PBS,2 mM EDTA和0.5% BSA。缓冲液需预先经0.22 μm滤膜过滤灭菌。
将100 μL的细胞悬液(含1×10^7个细胞)加入无菌流式管底部,再加入2 μL Biotin-Antibody Mix,混匀后在4°C下孵育10 min。
注:将细胞加入流式管底部时,避免沿管壁添加。若分选更多细胞,Biotin-Antibody Mix的用量需按比例增加。根据磁力架的不同,也可使用离心管进行细胞分选。
磁珠预处理:涡旋振荡重悬磁珠,将所需量的磁珠移至1.5 mL离心管中,加入1 mL分选缓冲液,10000 g离心1 min,弃去上清。重复以上洗涤步骤一次。加入与原体积相同的分选缓冲液重悬磁珠。若使用20 μL磁珠进行清洗,则清洗后用20 μL分选缓冲液重悬。
细胞孵育结束后,在流式管中加入20 μL经过预处理的Streptavidin Magnetic Beads,混合均匀,4°C下孵育10 min。
注:若分选的细胞数量较多,Streptavidin Magnetic Beads的用量需按比例增加。例如,分选5×10^7个细胞时,在500 μL细胞悬液中加入10 μL Biotin-Antibody Mix和100 μL Streptavidin Magnetic Beads。若分选的细胞少于1×10^7个,则应将细胞悬液体积补至100 μL,并加入2 μL Biotin-Antibody Mix和20 μL Streptavidin Magnetic Beads。
孵育结束后,在流式管中加入2.5 mL分选缓冲液,用移液器轻轻吹打混匀5次,避免剧烈振荡或上下颠倒混匀。
将装有细胞的流式管置于磁力架上静置5 min。
将含有纯化CD34+细胞的细胞悬液轻轻倒入无菌离心管中,倒出过程中流式管保持在磁力架上。500 g离心5 min,弃去上清,收集细胞。
注:为进一步提高CD34+细胞的富集效果,可根据实验需要重复步骤2-7一次。
根据实验要求洗涤细胞后,将其重悬于所需的缓冲液或培养基中,便可用于后续的分子生物学或细胞生物学实验。
保存条件:4℃,2年。
陶术 人 CD34+细胞富集试剂盒(阴性选择)
产品订购信息:
C0066 人 CD34 + 细胞富集试剂盒(阴性选择) 2mL (for 1×10^9 cells)
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