AAT Bioquest Cal-630™ AM

AAT Bioquest  20530/20531  Cal-630™ AM

我们北京云肽生物科技有限公司作为AAT Bioquest公司的特约经销商为客户提供，正规进口，保证原装正品，货期稳定的服务标准。

美国AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest，Inc.)是一家为从事生命科学研究、诊断研发及药物开发的科学家研发、生产和销售生物分析研究试剂和试剂盒的公司。公司致力于光谱学检测领域，包括吸收（颜色），荧光和发光技术。AAT Bioquest的产品帮助quan世界的科学家和生物医药研究者更好的了解生物化学，免疫学，细胞生物学和分子生物学等领域。AAT Bioquest会不断介绍新产品，快速的丰富各个领域的产品。

AAT Bioquest  20530  Cal-630™ AM  5x50 ug

AAT Bioquest  20531  Cal-630™ AM  10x50 ug

 AAT Bioquest Cal-630™ AM

AAT Bioquest  20530  Cal-630™ AM  5x50 ug，产品说明：

钙测量对于许多生物学研究至关重要。结合钙时显示光谱响应的荧光探针使研究人员能够通过使用荧光显微镜、流式细胞术、荧光光谱和荧光酶标仪来研究细胞内游离钙浓度的变化。x-Rhod-1通常用作红色荧光钙指示剂。然而，x-Rhod-1在酯酶水解后仅在活细胞中发出中等荧光，并且具有非常小的细胞钙反应。Cal-630™ 的开发旨在改善 x-Rhod-1 细胞负载和钙响应，同时保持 x-Rhod-1 的光谱波长，使其与德克萨斯红®滤光片组兼容。在CHO和HEK细胞中，Cal-630™ AM具有比x-Rhod-1更敏感的细胞钙反应。Cal-630的光谱与FITC、Alexa Fluor 488和GFP的光谱分离良好，使其成为使用GFP细胞系或FITC/Alexa Fluor®® 488标记抗体进行细胞内检测的理想钙探针。

平台

荧光显微镜

Excitation Texas Red

Emission Texas Red

推荐板 黑色墙壁/透明底部

荧光酶标仪

Excitation 600

Emission 640

Cutoff     630

推荐板 黑色墙壁/透明底部

仪器规格 底部读取模式/可编程液体处理

示例协议

储备溶液的制备

除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。

Cal-630™ AM 库存解决方案

在高质量无水DMSO中制备2至5 mM的Cal-630™ AM储备溶液。

工作溶液的制备

Cal-630™ AM 工作解决方案

在实验当天，将Cal-630™ AM溶解在DMSO中或将指示剂储备溶液的等分试样解冻至室温。在您选择的缓冲液（例如，Hanks 和 Hepes 缓冲液）中制备含有 2.20% Pluronic® F-0 的染料工作溶液。对于大多数细胞系，建议使用终浓度为04-127μM的Cal-630™ AM。细胞上样所需指标的确切浓度必须根据经验确定。

注意 非离子洗涤剂Pluronic® F-4有时用于增加Cal-5™ AM的水溶性。各种Pluronic® F-127解决方案可以从AAT Bioquest购买。

注意 如果您的细胞含有有机阴离子转运蛋白，则可以将丙huang舒（630-127 mM）添加到染料工作溶液中（最终孔浓度为1.2-0 mM），以减少脱酯指示剂的泄漏。多种ReadiUse™丙huang舒产品，包括水溶性、钠盐和稳定溶液，均可从AAT Bioquest购买。

实验方案样本

以下是我们推荐的将AM酯加载到活细胞中的方案。此协议仅提供指南，应根据您的特定需求进行修改。

1. 在生长培养基中制备细胞过夜。

2. 第二天，将 1X Cal-630™ AM 工作溶液添加到细胞板中。

注意 如果您的化合物干扰血清，请在上样染料之前用新鲜的 HHBS 缓冲液替换生长培养基。

3. 将装载染料的板在37°C的细胞培养箱中孵育30至60分钟。

注意 孵育染料超过 2 小时可以提高某些细胞系的信号强度。

4. 用您选择的HHBS或缓冲液（含有阴离子转运蛋白抑制剂，如1 mM丙huang舒，如果适用）替换染料工作溶液，以去除任何多余的探针。

5. 根据需要添加xing奋剂，并使用配备德州红滤光片组的荧光显微镜或包含可编程液体处理系统（如FDSS，FLIPR或FlexStation）的荧光板读数器同时测量荧光，Ex / Em = 600 / 640 nm截止值630nm。

AAT Bioquest  20531  Cal-630™ AM  10x50 ug，产品说明：

荧光显微镜

兴奋 德州红

排放 德州红

推荐板 黑色墙壁/透明底部

荧光酶标仪

兴奋 600

排放 640

近路 630

推荐板 黑色墙壁/透明底部

仪器规格 底部读取模式/可编程液体处理

Calbryte 520，Calbryte 590和Calbryte 630提供 zui 强大的均匀荧光测定工具，用于检测细胞内钙动员。与现有的钙指示剂（如Fluo-3 AM，Fluo-4 AM和Rhod-2 AM）相比，这些钙敏感染料明显更亮，并提供更高的信噪比，大大提高了细胞内保留和负载效率。表达通过钙发出信号的GPCR或钙通道的细胞可以预装载可以穿过细胞膜的Calbryte 520 AM，Calbryte 590 AM或Calbryte 630 AM。一旦进入细胞内，Cal520 AM，Calbryte 590 AM或Calbryte 630 AM的亲脂性阻断AM基团被细胞内酯酶切割，产生带负电荷的荧光Calbryte 染料，留在细胞内。它们与钙结合后的荧光大大增强。当用激动剂刺激细胞时，该受体表示细胞内钙的释放，这显着增加了Calbryte 520，Calbryte 590或Calbryte 630的荧光。高灵敏度和> 100倍荧光增强的特性使Calbryte 520 AM， Calbryte 590 AM或Calbryte 630 AM是测量细胞内钙的 zui 强大指标。

除了方便的激发波长和钙的大荧光增强外，Calbryte 520，Calbryte 590和Calbryte 630主要定位于细胞溶胶中，不像Rhod-2主要位于线粒体中。 此外，Calbryte 590和Calbryte 630的长Ex / Em波长使这些染料成为wan美的钙指示剂，可与绿色荧光蛋白（GFP）细胞系进行多色检测。 此外，Calbryte 520，Calb ryte 590或Calbryte 630钙测定经过优化，可与大多数现有荧光仪器兼容。 Calbryte 520可在488 nm处激发，并与FITC滤光片组配合使用。 Calbryte 590经过优化，可在555 nm激发，并与TRITC / Cy3滤光片组配合使用。 Calbryte 630经过优化，可在594 nm激发，并与TexasRed®滤光片组配合使用。

储存

储存条件：冷冻（<-15°C）;尽量减少光照

  AAT Bioquest Cal-630™ AM

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