AAT Bioquest 荧光/比色L-乳*测定试剂盒

AAT Bioquest 13814/13815 Amplite® Fluorimetric/Colorimetric L-Lactate Assay Kit

我们北京云肽生物科技有限公司作为AAT Bioquest公司的特约经销商为客户提供，正规进口，保证原装正品，货期稳定，折扣好的服务标准。

美国AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest，Inc.)是一家为从事生命科学研究、诊断研发及药物开发的科学家研发、生产和销售生物分析研究试剂和试剂盒的公司。公司致力于光谱学检测领域，包括吸收（颜色），荧光和发光技术。AAT Bioquest的产品帮助quan世界的科学家和生物医药研究者更好的了解生物化学，免疫学，细胞生物学和分子生物学等领域。AAT Bioquest会不断介绍新产品，快速的丰富各个领域的产品。

AAT Bioquest  13814  Amplite® Fluorimetric L-Lactate Assay Kit  200 Tests

AAT Bioquest  13815  Amplite® Colorimetric L-Lactate Assay Kit  200 Tests

 AAT Bioquest  荧光/比色L-乳suan测定试剂盒

AAT Bioquest  13814  Amplite® Fluorimetric L-Lactate Assay Kit  200 Tests产品说明：

乳酸是手性的，具有两种光学异构体：L-乳酸和D-乳酸。乳酸在新陈代谢和运动过程中通过乳酸脱氢酶（LDH）不断由**酸产生。监测乳酸水平是评估组织需氧量和利用量之间平衡的好方法，在研究细胞和动物生理学时很有用。D-乳酸不被哺乳动物代谢，其从体内消除主要取决于肾脏排泄。D-和L-乳酸存在于许多发酵乳制品中，如酸奶和奶酪，也存在于腌制蔬菜和腌制肉类和鱼类中。D-和L-乳酸（由细菌产生）是食物的质量指标，如鸡蛋、牛奶、果汁和葡萄酒。血液中异常高浓度的D-乳酸通常反映了胃肠道中细菌过度生长。亚洲空运中心Bioquest的Amplite®乳酸检测试剂盒（L-乳酸检测的Cat#13814和13815，D-乳酸检测的Cat#13810和13811）提供基于荧光和吸光度的方法，用于检测血清、血浆、尿液等生物样品以及细胞培养样品中的L-乳酸或D-乳酸。在酶偶联测定中，乳酸与NADH成比例相关，NADH由荧光NADH传感器特异性监测。荧光酶标仪可以读取信号。使用这款荧光Amplite ® L-乳酸检测试剂盒，我们能够在 1 μL 反应体积中检测到低至 4.100 μM 的 L-乳酸。

平台

荧光酶标仪

Excitation 540 纳米

Emission 590 纳米

Cutoff     570 纳米

推荐板 纯黑色

组件

组分A：酶混合物    2瓶（冻干粉）

组分B：检测缓冲液 1 瓶 （10 mL）

组件 C：NAD        1瓶

组分D：L-乳酸标准品 2.25毫克/瓶

示例协议

一目了然

协议摘要

1. 制备L-乳酸工作溶液（50μL）

2. 加入L-乳酸标准品或测试样品（50 μL）

3. 在室温下孵育30分钟 - 2小时

4. 在Ex/Em = 540/590 nm处监测荧光增加

重要注意事项

在开始实验之前，在室温下解冻每个试剂盒组分的一小瓶。

储备液的制备

除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。

1. NAD 储备液 （100X）：

加入 100 μL H2O放入NAD（组分C）的小瓶中，制成100X NAD储备溶液。

2. L-乳酸标准溶液（100 mM）：

加入 200 μL H2O或1x PBS缓冲液放入L-乳酸标准品（组分D）的小瓶中，制成100 mM L-乳酸标准溶液。

标准溶液的制备

L-乳酸标准品

将 10 μL L-乳酸储备溶液加入 990 μL PBS 缓冲液中，生成 1 mM L-乳酸标准溶液 （Lac7）。取1 mM L-乳酸标准溶液并进行1：3系列稀释，以获得L-乳酸标准品（Lac6 - Lac1）的系列稀释液。注意：稀释的L-乳酸标准溶液不稳定，应在4小时内使用。

工作溶液的制备

将 5 mL 检测缓冲液（组分 B）加入一瓶酶探针（组分 A）中。将 50 μL NAD 储备溶液 （100X） 加入组分 A 的瓶中，并充分混合。注意：这种L-乳酸工作溶液不稳定，应及时使用。

实验方案样本

表 1.L-乳酸标准品和测试样品在纯黑色96孔微孔板中的布局。Lac= L-乳酸标准品（Lac1 - Lac7，1μM至1 mM），BL=空白对照，TS=测试样品。

提单 提单 TS TS

紫胶1 紫胶1 ... ...

紫胶2 紫胶2 ... ...

紫胶3 紫胶3    

紫胶4 紫胶4    

紫胶5 紫胶5    

紫胶6 紫胶6    

紫胶7 紫胶7    

表 2.每个孔的试剂组成。

井 卷 试剂

紫胶1 - 紫胶7 50 微升 连续稀释（1 μM 至 1 mM）

提单 50 微升 稀释缓冲液

TS 50 微升 测试样品

1. 根据表1和2中提供的布局制备L-乳酸标准品（Lac），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于 384 孔板，每孔使用 25 μL 试剂而不是 50 μL。

2. 向L-乳酸标准品、空白对照和测试样品的每个孔中加入50 μL L-乳酸工作溶液，使L-乳酸测定总体积为100μL/孔。对于 384 孔板，向每个孔中加入 25 μL L-乳酸工作溶液，总体积为 50 μL/孔。

3. 将反应物在室温下孵育30分钟至2小时，避光。

4. 使用荧光板读数器在激发= 530 - 570 nm，发射= 590 - 600 nm（最佳Ex / Em = 540 / 590 nm，在570 nm处截止）监测荧光增加。

AAT Bioquest  13815  Amplite® Colorimetric L-Lactate Assay Kit  200 Tests，产品说明：

乳酸是手性的，具有两种光学异构体：L-乳酸和D-乳酸。乳酸在新陈代谢和运动过程中通过乳酸脱氢酶（LDH）不断由**酸产生。监测乳酸水平是评估组织需氧量和利用量之间平衡的好方法，在研究细胞和动物生理学时很有用。D-乳酸不被哺乳动物代谢，其从体内消除主要取决于肾脏排泄。D-和L-乳酸存在于许多发酵乳制品中，如酸奶和奶酪，也存在于腌制蔬菜和腌制肉类和鱼类中。D-和L-乳酸（由细菌产生）是食物的质量指标，如鸡蛋、牛奶、果汁和葡萄酒。血液中异常高浓度的D-乳酸通常反映了胃肠道中细菌过度生长。亚洲空运中心Bioquest的Amplite®乳酸检测试剂盒（L-乳酸检测的Cat#13814和13815，D-乳酸检测的Cat#13810和13811）提供基于荧光和吸光度的方法，用于检测血清、血浆、尿液等生物样品以及细胞培养样品中的L-乳酸或D-乳酸。在酶偶联测定中，乳酸与NADH成比例相关，NADH由显色NADH传感器特异性监测。吸光度酶标仪可以在~A575nm/A605nm的吸光度比下轻松读取该信号，以提高测定灵敏度。使用这种比色Amplite ® L-乳酸检测试剂盒，我们能够在 4 μL 反应体积中检测到低至 100 μM 的 L-乳酸。

平台

吸光度酶标仪

吸光度 575/605 纳米

推荐板 清除底部

组件

组分A：酶探针 2瓶（冻干粉）

组分B：检测缓冲液 1 瓶 （10 mL）

组件 C：NAD 1瓶

组分D：L-乳酸标准品 2.25毫克/瓶

示例协议

一目了然

协议摘要

1. 制备L-乳酸标准品或测试样品（50 μL）

2. 加入L-乳酸工作溶液（50μL）

3. 在室温下孵育30分钟 - 2小时

4. 监测吸光度比在A处增加575纳米/一个605纳米

重要 在开始实验之前，在室温下解冻每个试剂盒组分的一瓶。

储备溶液的制备

除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。

1. NAD储备液（100X）

加入 100 μL H2O放入NAD（组分C）的小瓶中，制成100X NAD储备溶液。

2. L-乳酸标准溶液（100 mM）

加入 200 μL H2O或1x PBS缓冲液放入L-乳酸标准品（组分D）的小瓶中，制成100mM L-乳酸标准溶液。

标准溶液的制备

L-乳酸标准品

将 10 μL 100 mM L-乳酸标准溶液加入 990 μL 1xPBS 缓冲液中，生成 1 mM L-乳酸标准溶液 （SD7）。取1 mM L-乳酸标准溶液（SD7），在1xPBS缓冲液中进行3：1连续稀释，以获得连续稀释的L-乳酸标准品（SD6 - SD1）。注意：稀释的L-乳酸标准溶液不稳定，应在4小时内使用。

工作溶液的制备

1. 将 5 mL 检测缓冲液（组分 B）加入一瓶酶探针（组分 A）中，并充分混合。

2. 将 50 μL 100X NAD 储备溶液加入组分 A+B 的瓶中，充分混合制成 L-乳酸工作溶液。

注意 这种L-乳酸工作溶液足以用于一个96孔板。不稳定，应在2小时内及时使用。避免暴露在光线下。

注意 或者，可以通过将 50 μL H 100 O 加入酶混合物瓶（组分 A）中来制备 2X 的 L-乳酸酶储备溶液，然后将储备溶液与测定缓冲液（组分 B）和 100X NAD 储备溶液按比例混合来制备 L-乳酸工作溶液。

实验方案样本

表 1. L-乳酸标准品和测试样品在白色透明底部96孔微孔板中的布局。SD=L-乳酸标准品（SD1 - SD7，1至1000μM），BL=空白对照，TS=测试样品。

表 2. 每个孔的试剂组成。

1. 根据表1和表2中提供的布局制备L-乳酸标准品（SD），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于 384 孔板，每孔使用 25 μL 试剂而不是 50 μL。

2. 向L-乳酸标准品、空白对照和测试样品的每个孔中加入50 μL L-乳酸工作溶液，使L-乳酸测定总体积为100μL/孔。对于 384 孔板，向每个孔中加入 25 μL L-乳酸工作溶液，总体积为 50 μL/孔。

3. 将反应物在室温下孵育30分钟至2小时，避光。

4. 用吸光板读数仪在A处监测吸光度比增加575纳米/一个605纳米.

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