AAT Bioquest比色超氧化物歧化酶测定试剂盒

AAT Bioquest11305 Amplite® Colorimetric Superoxide Dismutase (SOD) Assay Kit 200Tests 

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美国AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest，Inc.)是一家为从事生命科学研究、诊断研发及药物开发的科学家研发、生产和销售生物分析研究试剂和试剂盒的公司。公司致力于光谱学检测领域，包括吸收（颜色），荧光和发光技术。AAT Bioquest的产品帮助quan世界的科学家和生物医药研究者更好的了解生物化学，免疫学，细胞生物学和分子生物学等领域。AAT Bioquest会不断介绍新产品，快速的丰富各个领域的产品。

AAT Bioquest11305 Amplite® Colorimetric Superoxide Dismutase (SOD) Assay Kit 200Tests，产品简介：

产品品牌：AAT Bioquest

产品货号：11305

产品名称：Amplite®比色超氧化物歧化酶（SOD）测定试剂盒

英文名称：Amplite® Colorimetric Superoxide Dismutase (SOD) Assay Kit

产品规格：200 Tests

 AAT Bioquest比色超氧化物歧化酶测定试剂盒

产品说明：

超氧化物歧化酶（SOD）是一类催化超氧化物歧化为氧气和过氧化氢的酶。超氧化物是细胞中的主要活性氧之一。它是与神经退行性疾病、缺血再灌注损伤、动脉粥样硬化和衰老相关的病理学的重要贡献者。SOD是几乎所有暴露于超氧自由基的细胞中重要的抗氧化防御。事实上，缺乏SOD1的小鼠会出现多种疾病，包括肝细胞癌，与年龄相关的肌肉质量损失加速，白内障的早期发病率和寿命缩短。SOD的过表达可保护小鼠纤维肉瘤细胞免于凋亡并促进细胞分化。Amplite® 比色法超氧化物歧化酶 （SOD） 检测试剂盒为测量溶液中的 SOD 活性提供了一种快速灵敏的方法。在测定中，黄嘌ling通过黄嘌ling氧化酶（XO）转化为超氧自由基离子，尿酸和过氧化*。超氧化物与ReadiView™ SOD560反应，生成吸收约560nm的产物。SOD抑制ReadiView™ SOD560与超氧化物的反应，从而降低560nm处的吸收。ReadiView™ SOD560在560nm处吸收的减少与SOD活性成正比。该试剂盒可以方便地以 96 孔或 384 孔微量滴定板形式进行。

组件

组件 A：ReadiView™ SOD560 2 瓶

组分B：50X黄嘌ling 1 瓶 （100 μL）

组分C：黄嘌ling氧化酶 2瓶

组分D：SOD标准品 1瓶（500单位）

组分E：检测缓冲液 1 瓶 （20 mL）

示例协议

一目了然

协议摘要

1. 制备 SOD 标准品或测试样品 （50 μL）

2. 加入 SOD 工作溶液 1 （25 μL）

3. 加入 SOD 工作溶液 2 （25 μL）

4. 在室温下孵育 30 - 60 分钟

5. 监测560 nm处的吸光度

重要事项 在开始实验之前，在室温下解冻所有试剂盒组分。

储备溶液的制备

除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。

SOD 标准溶液 （10 kU/mL）

将 50 μL 测定缓冲液（组分 E）加入 SOD 标准品（组分 D）小瓶中，制成 10 kU/mL 标准溶液。

标准溶液的制备

SOD标准

将 10 μL 10 kU/mL SOD 标准溶液加入 990 μL 检测缓冲液（组分 E）中，得到 100 U/mL SOD 标准溶液 （SD7）。取 100 U/mL SOD 标准溶液 （SD7），在测定缓冲液（组分 E）中以 1：10 的比例进行，得到 10 U/mL SOD 标准溶液 （SD6）。取 10 U/mL 标准溶液 （SD6） 并进行 1：3 连续稀释，以获得带有测定缓冲液（组分 E）的连续稀释的 SOD 标准品 （SD5 - SD1）。

工作溶液的制备

1. SOD工作溶液1

将 2.5 mL 检测缓冲液（组分 E）加入 ReadiView^TM SOD560（组分A）并充分混合。然后将 50 μL 的 50X 黄嘌ling（组分 B）加入该瓶中，制成 SOD 工作溶液 1。

注意本SOD工作溶液1应在实验前制备，并避光保存。SOD工作溶液1不稳定，未使用部分应丢弃。

2. SOD工作溶液2

将 50 μL 测定缓冲液（组分 E）加入黄嘌ling氧化酶（组分 C）小瓶中并充分混合。然后，将 50 μL 黄嘌ling氧化酶储备溶液转移到 2.5 mL 测定缓冲液（组分 E）中，制成 SOD 工作溶液 2。

实验方案样本

表 1. SOD标准品和测试样品在透明底部96孔微孔板中的布局。SD=SOD标准品（SD1 - SD7，0.041至100 U/mL）;BL=空白控件;TS=测试样品。

表 2. 每个孔的试剂组成。

1. 根据表1和表2中提供的布局制备SOD标准品（SD），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于 384 孔板，每孔使用 25 μL 试剂而不是 50 μL。

2. 向SOD标准品、空白对照和测试样品的每个孔中加入25 μL SOD工作溶液1，使总测定体积为75 μL/孔。对于 384 孔板，向每个孔中加入 12.5 μL SOD 工作溶液 1，总体积为 37.5 μL/孔。

3. 向SOD标准品、空白对照和测试样品的每个孔中加入25μLSOD工作溶液2，使总测定体积为100μL/孔。对于 384 孔板，向每个孔中加入 12.5 μL SOD 工作溶液 2，总体积为 50 μL/孔。

4. 将反应在室温下孵育30至60分钟，避光。

5. 用吸光度酶标仪在550至560nm处监测吸光度。

 AAT Bioquest比色超氧化物歧化酶测定试剂盒

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