AATReadiLinkRapidiFluor488抗体标记试剂盒

AAT Bioquest1255 ReadiLink™ Rapid iFluor® 488 Antibody Labeling Kit *Microscale Optimized for Labeling 50 µg Antibody Per Reaction* 

我们北京云肽生物科技有限公司作为AAT Bioquest公司的特约经销商为客户提供，正规进口，保证原装正品，货期稳定，折扣好的服务标准。

美国AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest，Inc.)是一家为从事生命科学研究、诊断研发及药物开发的科学家研发、生产和销售生物分析研究试剂和试剂盒的公司。公司致力于光谱学检测领域，包括吸收（颜色），荧光和发光技术。AAT Bioquest的产品帮助quan世界的科学家和生物医药研究者更好的了解生物化学，免疫学，细胞生物学和分子生物学等领域。AAT Bioquest会不断介绍新产品，快速的丰富各个领域的产品。

 AATReadiLinkRapidiFluor488抗体标记试剂盒

AAT Bioquest1255 ReadiLink™ Rapid iFluor® 488 Antibody Labeling Kit *Microscale Optimized for Labeling 50 µg Antibody Per Reaction*，产品简介：

产品品牌：AAT Bioquest

产品货号：1255

产品名称：ReadiLink™Rapid iFluor®488抗体标记试剂盒*用于标记50微米的微型优化；g每个反应的抗体*

英文名称：ReadiLink™ Rapid iFluor® 488 Antibody Labeling Kit *Microscale Optimized for Labeling 50 µg Antibody Per Reaction*

产品规格：2 Labelings

产品说明：

尽管FITC仍然是制备绿色荧光生物偶联物zui常用的荧光标记染料，但FITC存在一定的局限性，例如显微镜成像的严重光漂白和pH敏感荧光。与荧光素衍生物（如FITC）的偶联物相比，用iFluor® 488染料制备的蛋白质偶联物要*得多。iFluor® 488偶联物比荧光素偶联物明显更亮，并且更易于光化。此外，iFluor® 488的荧光不受pH值（4-10）的影响。这种pH不敏感性是对荧光素的重大改进，荧光素仅在pH高于9时发出最大荧光。ReadiLink™ 标记试剂盒基本上只需要 2 个简单的混合步骤，无需色谱柱纯化。该ReadiLink™试剂盒中使用的iFluor® 488 SE相当稳定，并且对蛋白质氨基基团具有良好的反应性和选择性。该试剂盒具有标记~2x50 ug抗体的所有基本成分。试剂盒中提供的两瓶iFluor® 488染料中的每一个都针对标记~50 μg抗体进行了优化。iFluor 488 SE蛋白标记试剂盒提供了一种使用iFluor®® 10 SE标记单克隆、多克隆抗体或其他蛋白（>488 kDa）的便捷方法。 

组件

组分 A：iFluor™ 488 2 个小瓶（一个小瓶用于 50 μg 蛋白质）

组分B：反应缓冲液 1 瓶 （20 μL）

组分C：TQ™染色淬火缓冲液 1 瓶 （20 μL）

示例协议

一目了然

重要

在打开之前加热所有组分并短暂离心小瓶，并在开始偶联之前立即准备所需的溶液。以下协议仅供参考。

工作溶液的制备

蛋白质工作溶液（溶液A）

要标记 50 μg 蛋白质（假设目标蛋白质浓度为 1 mg/mL），请将 5 μL（占总反应体积的 10%）反应缓冲液（组分 B）与 50 μL 目标蛋白质溶液混合。

注意 如果您的蛋白质浓度不同，请相应地调整蛋白质体积，使 ~50 μg 蛋白质可用于标记反应。

注意 要标记 100 μg 蛋白质（假设目标蛋白质浓度为 1 mg/mL），请将 10 μL（占总反应体积的 10%）反应缓冲液（组分 B）与 100 μL 目标蛋白质溶液混合。

注意蛋白质应溶解在1X磷酸盐缓冲盐水（PBS），pH 7.2 - 7.4中;如果蛋白质溶解在甘an酸缓冲液中，则必须对1X PBS，pH 7.2 - 7.4进行透析，或使用Amicon Ultra-0.5，Ultracel-10膜，10 kDa（来自密理博的cat#UFC501008）去除广泛用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐（如**铵和乙**）。

注意 不纯抗体或用牛血清白蛋白 （BSA） 或明胶稳定的抗体不会很好地标记。

注意 为了获得最佳标记效率，建议最终蛋白质浓度范围为 1 - 2 mg/mL，当偶联效率低于 1 mg/mL 时会显著降低。

实验方案样本

运行偶联反应

1. 将蛋白质工作溶液（溶液A）添加到一瓶标记染料（组分A）中，并通过重复移液几次或涡旋小瓶几秒钟来充分混合。

注意 如果标记 100 μg 蛋白质，请使用两个标记染料的小瓶（组分 A），方法是将 100 μg 蛋白质分成 2 x 50 μg 蛋白质，并将每 50 μg 蛋白质与一瓶标记染料反应。然后将两个小瓶合并以进行下一步。

2. 将偶联反应混合物在室温下保持30-60分钟。

注意 如果需要，共轭反应混合物可以旋转或摇动更长的时间。

停止偶联反应

1. 将 5 μL（用于 50 μg 蛋白质）或 10 μL（用于 100 μg 蛋白质）添加到共轭反应混合物中，占 TQ™ 染色淬灭缓冲液（组分 C）总反应体积的 10%;混合均匀。

2. 在室温下孵育10分钟。标记的蛋白质（抗体）现在可以使用了。

蛋白质偶联物的储存

蛋白偶联物应在载体蛋白（例如 0.5% 牛血清白蛋白）存在下储存在 > 0.1 mg/mL 下。为了延长储存时间，蛋白质偶联物可以冻干或分成一次性等分试样，并在≤ –20°C下储存。

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