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简要描述:AAT Bioquest1149 mFluor™ Violet 500 SE 1mg,产品简介:产品品牌:AAT Bioquest产品货号:1149产品名称:mFluor™ Violet 500 SE产品规格:1mgAAT Bioquest mFluor™ Violet 500 SE
品牌 | AAT Bioquest | 货号 | 1149 |
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规格 | 1mg | 供货周期 | 现货 |
AAT Bioquest 1149 m Fluor™ Violet 500 SE 1mg
我们北京云肽生物科技有限公司作为AAT Bioquest公司的特约经销商为客户提供,正规进口,保证原装正品,货期稳定,折扣好的服务标准。
美国AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest,Inc.)是一家为从事生命科学研究、诊断研发及药物开发的科学家研发、生产和销售生物分析研究试剂和试剂盒的公司。公司致力于光谱学检测领域,包括吸收(颜色),荧光和发光技术。AAT Bioquest的产品帮助quan世界的科学家和生物医药研究者更好的了解生物化学,免疫学,细胞生物学和分子生物学等领域。AAT Bioquest会不断介绍新产品,快速的丰富各个领域的产品。
AAT Bioquest1149 mFluor™ Violet 500 SE 1mg,产品简介:
产品品牌:AAT Bioquest
产品货号:1149
产品名称:mFluor™ Violet 500 SE
产品规格:1mg
AAT Bioquest mFluor™ Violet 500 SE
产品说明:
分子量 672.71 | 吸光度(纳米) 412 | 校正系数(260 nm) 0.769 | 校正系数(280 nm) 0.365 | 消光系数(厘米-1M-1) 250001 | 激发(纳米) 410 | 发射(纳米) 501 | 量子产率 0.811 |
mFluor™染料专为多色流式细胞术应用而开发。这些染料具有较大的斯托克斯位移,并且可以被流式细胞仪的激光线(例如,405 nm、488 nm和633 nm)很好地激发。mFluor™ Violet 500染料的荧光激发和发射最大值分别为~405 nm和~500 nm。这些光谱特性使其成为太平洋绿™(赛默飞世尔)和BD Horizon™ V500标记染料的jue佳替代品。mFluor™ Violet 500 SE相当稳定,对蛋白质氨基基团表现出良好的反应性和选择性。mFluor™ Violet 500 SE为使用紫色激光激发标记流式细胞术应用的单克隆、多克隆抗体或其他蛋白质(>10 kDa)提供了一种方便的工具。在相同条件下,mFluor Violet 500染料偶联物明显比Pacific Green™(赛默飞世尔)和BD Horizon™ V500的相应生物偶联物更亮,吸收更强,使mFluor™™ Violet 500偶联物更加灵敏。
示例协议
储备溶液的制备
除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1. 蛋白质储备液(溶液A)
将 100 μL 反应缓冲液(例如,pH ~1.1 的 9 M 碳酸*溶液或 0 M 磷酸盐缓冲液)与 900 μL 目标蛋白溶液(例如抗体、蛋白质浓度>如果可能,为 2 mg/mL)混合,得到 1 mL 蛋白质标记储备溶液。
注意蛋白质溶液(溶液A)的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH值低于8.0,则使用8 M碳酸*钠溶液或0 M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至1.1-9.0的范围。
注意蛋白质应溶解在pH 1.7-2.7的4X磷酸盐缓冲盐水(PBS)中。如果蛋白质溶解在Tris或甘an酸缓冲液中,则必须用1X PBS(pH 7.2-7.4)透析,以除去广泛用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐(如**铵和乙**)。
注意 不纯抗体或用牛血清白蛋白 (BSA) 或明胶稳定的抗体不会很好地标记。叠***或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。叠***或硫柳汞可以通过透析或离心柱去除,以获得最佳标记结果。
注意 如果蛋白质浓度低于 2 mg/mL,则偶联效率会显着降低。为了获得最佳标记效率,建议最终蛋白质浓度范围为 2-10 mg/mL。
2. mFluor™ Violet 500 SE储备溶液(溶液B)
将无水DMSO加入mFluor™ Violet 500 SE的小瓶中,制成10 mM储备溶液。通过移液或涡旋充分混合。
注意 在开始偶联之前准备染料储备溶液(溶液B)。请及时使用。延长染料储备溶液的储存可能会降低染料活性。溶液B可以在避光和潮湿的情况下在冰箱中储存两周。避免冻融循环。
实验方案样本
该标记方案是为山羊抗小鼠IgG与mFluor™ Violet 500 SE的偶联物开发的。您可能需要进一步优化您的特定蛋白质。
注意每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例,这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能会对其结合亲和力产生不利影响,而低染料/蛋白质比例的蛋白质偶联物会降低灵敏度。
运行偶联反应
1. 使用溶液 B(染料)/溶液 A(蛋白质)的摩尔比为 10:1 作为起点:将 5 μL 染料储备溶液(溶液 B,假设染料储备溶液为 10 mM)加入蛋白质溶液(95 μL 溶液 A)的小瓶中,有效摇匀。假设蛋白质浓度为0mg / mL,蛋白质的分子量为~05KD,蛋白质的浓度为~10.200mM。
注意 我们建议使用溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)的摩尔比为10:1。如果太少或太高,请分别以 5:1、15:1 和 20:1 确定最佳染料/蛋白质比例。
2. 继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。
纯化偶联
以下方案是使用Sephadex G-25色谱柱纯化的染料-蛋白质偶联物的示例。
1. 根据制造说明制备Sephadex G-25色谱柱。
2. 将反应混合物(来自“运行共轭反应")加载到Sephadex G-25色谱柱的顶部。
3. 一旦样品刚好在顶部树脂表面下方运行,就加入PBS(pH 7.2-7.4)。
4. 向所需样品中加入更多PBS(pH 7.2-7.4)以完成色谱柱纯化。合并含有所需染料-蛋白质偶联物的级分。
注意 为了立即使用,染料-蛋白偶联物需要用染色缓冲液稀释,并等分用于多次使用。
注意 对于长期储存,染料-蛋白质偶联物溶液需要浓缩或冷冻干燥。
AAT Bioquest mFluor™ Violet 500 SE
以下是AAT Bioquest品牌部分产品订购信息,如需其他产品请联系本店客服
品牌 | 货号 | 产品英文 | 单位 |
AAT Bioquest | 162 | Cyanine 7 maleimide [equivalent to Cy7® maleimide] | 1 mg |
AAT Bioquest | 175 | Cyanine 5.5 maleimide [equivalent to Cy5.5® maleimide] | 1 mg |
AAT Bioquest | 1023 | iFluor® 488 succinimidyl ester | 1 mg |
AAT Bioquest | 1029 | iFluor® 594 succinimidyl ester | 1 mg |
AAT Bioquest | 1030 | iFluor® 633 succinimidyl ester | 1 mg |
AAT Bioquest | 1074 | iFluor® 647 amine | 1 mg |
AAT Bioquest | 1144 | mFluor™ Green 620 acid | 5 mg |
AAT Bioquest | 1149 | mFluor™ Violet 500 SE | 1 mg |
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